- 1 flakse sterilt vann
- En sprøyte (20 ml)
- 1 flakse med blå isopropanol
- 2 hvitløker
- Kjøkkenmaskin
- Salt
- Natron
- Sjampo
- Kaffefilter
- Desilitermål
- Isbiter
- Fryseboks
- Rørepinne
- Et klart glass
- To små skåler
- En litt større skål (en av de små skålene skal få plass i den store)
Vi begynte med å lage en buffer. Bufferen motvirker store endringer i pH- verdien i vannet. For å lage en buffer blandet vi 120 ml sterilt vann sammen med 1/4 ts salt og en ts natron. Da alt var oppløst tilsatte vi 1 ts med sjampo. Da ingrediensene var rørt godt sammen, lot vi den stå i en stor skål med isbiter.
Etter at bufferen var ferdig fremstilt, kunne vi begynne prosessen i å ta ut hvitløkens DNA. Etter at hvitløkene var blitt most til en jevn og fin masse, blandet vi tre ts av hvitløkspurén med 7 ts av den nedkjølene bufferen. Det er viktig å nå røre kraftig rundt i blandingen (2min) for å ødelegge celleveggene slik at ”innholdet” renner ut. Disse celleveggene er bygget av fett, og blir dermed løst opp av sjampoen i bufferen. Såpen løser opp fettet og får cellens proteiner til å klumpe seg.
DNA-molekylene som vi skal ha tak i, er faktisk løst i bufferen! Vi måtte dermed filtrere blandingen gjennom et kaffefilter. DNAet ble først synlig etter at vi tilsatte 10 ml iskald isopropanol og rørte forsiktig om i et min. Ispopropanolen skyver vannmolekylene, som omgir DNAet, vekk da alkohol er lettere enn vann.
Etter hvert som vannmolekylene måtte vike plass for alkoholen klumpet DNA-trådene seg sammen. Hvitløkens DNA ble synlig.





Ingen kommentarer:
Legg inn en kommentar